Nhân giống vô tính gừng bằng phương pháp nuôi cấy mô

NHÂN GIỐNG VÔ TÍNH GỪNG BẰNG PHƯƠNG PHÁP NUÔI CẤY MÔGiáo viên hướng dẫn:Ths.Huỳnh Trường HuêNội dung1.Nhân giống vô tính cây Gừng2.Một số phương pháp nuôi cấy mô3.Phương pháp nghiên cứu4.Kết quả và thảo luận5.Kết luận và kiến nghị6.Tài liệu tham khảoI.Nhân giống vô tính gừng:1 Giâm hom Hom gừng giống ủ trong tro trấu và tưới nước vừa đủ để nảy mầm tốt, thời gian 15 ngày.2 Cách trồng, chăm sóc và thu hoạch Trồng ở nơi có nhiều mùn và tơi xốp. Luống trồng đảm bảo thoát nước nhanh. Cần đào xới,làm cỏ và vun gốc. Thu hoạch cần cắt hết phần thân cây rồi sau đó mới đào củ( lúc gừng ngả vàng).II. Một số phương pháp nuôi cấy mô:Nuôi cấy chồi bênNuôi cấy đỉnh sinh trưởngNuôi cấy mô sẹoNuôi cấy tế bào đơnNuôi cấy protoplast_chuyển genIII.Phương pháp nghiên cứuChọn môi trường nuôi cấy: Khoáng đa vi lượng, đường,thạch,pH của môi trường,Cách khử trùng mẫuCủ Gừng giống vùi trong tro trấu 15 ngàyDùng dao cắt những chồi nonRửa sạch bằng nước máy Ngâm dung dịch xà phòng ( 10 – 15 phút)Rửa sạch bằng nước máyNgâm cồn 70o (2 phút) Rửa nước cất (3 lần) Ngâm trong dung dịch JavelRửa sạch bằng nước cất (3 – 5 lần)Bố trí thí nghiệm 1.Thí nghiệm 1: Khử trùng mẫu 2.Thí nghiệm 2: Khảo sát nồng độ BA thích hợp cho việc tạo chồi 3.Xử lý số liệu1.Khử trùng mẫu: Mẫu cấy được khử trùng sơ bộ,sau đó ngâm mẫu trong dung dịch Javel với nồng độ và thời gian như sauThời gian Tỷ lệ nước Javel ( phút)10 8:2 7:3 6:4 5:515 8:2 7:3 6:4 5:520 8:2 7:3 6:4 5:525 8:2 7:3 6:4 5:530 8:2 7:3 6:4 5:52. Khảo sát nồng độ BA thích hợp cho việc tạo chồi: Ao: Môi trường MS + 0 mg/l BA ( đối chứng) A1: Môi trường MS + 0,25 mg/l BA A2: Môi trường MS + 0,5 mg/l BA A3: Môi trường MS + 0,75 mg/l BA A4: Môi trường MS + 1 mg/l BA A5: Môi trường MS + 1,5 mg/l BA A6: Môi trường MS + 2 mg/l BA A7: Môi trường MS + 2,5 mg/l BA A8: Môi trường MS + 3 mg/l BAVI.Kết quả và thảo luận 1.Kết quả:Bảng 1: Ảnh hưởng của thời gian và tỉ lệ nước : Javel đến tỉ lệ mẫu cấy sống.Tỷ lệ nước : Javel8 : 27 : 36 : 45:5Thời gian (phút)Tỷ lệ mẫu cấy sống (%)100,000,0033,3433,34150,004,6739,3433,40200,0040,0073,3440,00250,0060,0073,3446,67300,0052,0053,3442,34 Xử lý mẫu bằng dung dịch Javel với tỷ lệ nước:Javel là 6:4 trong 20 phút trước khi cấy cho tỷ lệ mẫu sạch cao nhất Bảng 2 :Sự gia tăng số chồi ở 15,30 và 45 ngày sau khi cấyNghiệm thứcSố chồi của cây(chồi)15 ngày30 ngày45 ngàyA01,00c1,00e1,00dA11,25b1,45d2,15aA21,40ab1,64bc1,90abA31,28b1,55cd1,85abA41,03c1,18e1,27cA51,51a1,85a2,11abA61,28b1,61bcd2,00abA71,27b1,67abc1,90abA81,50a1,81ab2,06abCV%15,1313,0715,99F8,571*19,73*19,03*Bảng 3: Chiều cao chồi ở 15, 30 và 45 ngày sau khi nuôi cấyNghiệmthứcChiều cao cây chồi (cm)15 ngày30 ngày45 ngàyA0A1A2A3A4A5A6A7A81,00b2,10a2,37a2,17a2,25a2,25a1,78a2,26a2,29a1,00c2,15b2,45a2,46a2,68a2,42a1,95b2,29a2,58a1,00f2,39cd2,61bc2,73b3,05a2,65b2,06e2,31de2,52bcdCV%F12,5830,19*12,0635,48*11,7943,66* Bảng 4:Số lá của chồi ở 15, 30 và 45 ngày sau khi cấyNghiệmthứcSố lá của chồi (lá)15 ngày30 ngày45 ngàyA0A1A2A3A4A5A6A7A81,00b1,00b1,00b1,00b1,02b1,00b1,41a1,10b1,02b100e1,26de1,11e1,28cde1,51bc1,55bc1,64ab1,85a1,51bcd1,00d1,60bc1,30cd1,52bc2,00a1,61bc1,61bc1,70ab1,51bc Bảng 5: Ảnh hưởng của BA lên sự sinh trưởng và phát triển chồi Gừng in vitro ở 45 ngày sau khi nuôi cấy: Nghiệmthức45 ngàySố chồi (chồi)Chiều cao chồi(cm)Số lá của chồi (lá)A0A1A2A3A4A5A6A7A81,00d2,15a1,90ab1,85b1,27c2,11ab2,00ab1,90ab2,06ab1,00f2,38cd2,61bc2,73b3,05a2,65b2,06e2,31de2,52bcd1,00d1,60bc1,30cd1,52bc2,00a1,61bc1,61bc1,70ab1,51bcCV%11,2621,1623,14V.Kết luận và đề nghị:1.Kết luận: Tỉ lệ nước :Javel là 6:4 và thời gian là 20 phút tỉ lệ mẫu sạch cao nhất (73%) Nuôi cấy MS ở nồng độ 0,25mg BA/l cho hiệu quả cao nhất trong việc tao chồi Gừng in vitro ơ 45 ngày sau khi đã được cấy Để chồi Gừng in vitro phát triển tốt về chiều cao và số lá thì bổ sung bổ sung BA vào môi trường MS với nồng độ 1mg/l.2.Đề nghị:Nghiên cứu môi trường phát sinh chồi có sự tham gia tổng hợp của Cytokinin và Auxin.Khảo sát sự ảnh hưởng của các Cytokinin khác như Kinetin và 2iP trong quá trình nhân chồi.Đưa ra ngoài vườn trồng thí nghiệm.VI.Tài liệu tham khảo: Bùi Bá Bổng. 1995. Nhân giống cây trồng bằng nuôi cấy mô. An Giang: Sở Khoa Học Công Nghệ và Môi Trường An Giang. Dương Công Kiên. 2002. Nuôi cấy mô thực vật. TP Hồ Chí Minh: Đại Học Quốc Gia TP Hồ Chí Minh. .Giáp Kiều Hương., Bùi Thị Đoan Trang, Vương Ái Linh và Lê Thị Thủy. 2004. Kỹ thuật trồng Gừng. HN: NXB Nông Nghiệp. Lê Đình Mỡi, Dương Đức Huyến và Nguyễn Tiến Bân. 2002. “Cây Gừng”. Tài nguyên thực vật Đông Nam Á, số 5 – 2002: 3 – 15. Lâm Ngọc Phương. 1997. Nhân giống vô tính cây gừng (Zingiber officinale Rosc) bằng phương pháp nuôi cấy mô. Tuyển tập công trình khoa học công nghệ Đại Học Cần Thơ 1993 – 1997.Trả lời câu hỏi:Đối tượng nghiên cứu của đề tài: quy trình công nghệ nuôi cấy mô nhân giống vô tính cây gừng.Khách thể: phương pháp nuôi cấy mô để nhân giống vô tính cây GừngThanks!