Nông - Lâm - Ngư nghiệp - Công nghệ cấy truyền phôi

11 công nghệ cấy truyền phôi I. Khái niệm 2 Công nghệ cấy truyền phôi là một quá trình đa phôi được tạo ra từ cá thể bò mẹ này (bò cho phôi) vào cá thể bò mẹ khác (bò nhận phôi). Phôi vẫn sống, phát triển bình thường trên cơ sở trạng thái sinh lý sinh dục của bò nhận phôi phù hợp với trạng thái sinh lý, sinh dục của bò nhận phôi hoạc phù hợp với tuổi phôi (sự phù hợp này gọi là sự đồng pha). II. ý nghĩa CÔNG NGHệ CấY TRUYềN PHÔI Bò 3 1. Cấy truyền phôi phổ biến và nhân nhanh giống tốt, những đặc tính quý hiếm ra thực tế sản xuất trên cơ sở khai thác triệt để tiềm năng di truyền của những cá thể cái cao sản thông qua việc lấy - bảo quản phôi và cấy truyền những phôi của chúng. 2. Nâng cao cuờng độ chọn lọc, đẩy mạnh công tác giống trên cơ sở tăng nhanh tiến bộ di truyền hàng năm, thông qua: R= h2.S; g= R/L = (h2.S)/L + R: hiệu qủa chọn lọc + h2: Hệ số di truyền của tính trạng + L: Khoảng cách các thế hệ + S: Ly sai chọn lọc. 3. Nâng cao khả năng sinh sản, các sản phẩm thịt, sữa trong chăn nuôi bò. ý nghĩa CÔNG NGHệ CấY TRUYềN PHÔI Bò 4 4. Hạn chế mức tối thiểu số lượng gia súc làm giống, từ đó giảm các chi phí khác đi kèm như: chuồng trại, thức ăn, nhân lực 5. Giúp cho con ngời dễ dàng thuận lợi trong việc xuất khẩu, vận chuyển, trao đổi con giống giữa các nước, các vùng, các địa phương. 6. Một phương pháp bảo tồn, giữ gìn con giống dưới dạng trứng, phôi, tinh trùng - phương pháp giữ gìn vật liệu di truyền 7. Hạn chế một số dịch bệnh và nâng cao khả năng chống chịu bệnh, khả năng thích nghi cho con vật ở môi trường mới: không lây truyền bệnh, tăng sức đề kháng... 8. Làm cở sở thúc đẩy mạnh sự nghiên cứu và phát triển một số ngành khoa học có liên quan: sinh lý, di truyền, thú y... 2lịch sử CÔNG NGHệ CấY TRUYềN PHÔI Bò 5 1890 thí nghiệm đầu tiên về CTP thành công trên thỏ bởi Walter Heap. Ông là ngời sáng lập ra công nghệ CTP 1932: CTP thành công trên dê - Warwick và Berry 1933: CTP thành công trên chuột cống - Nicholas 1934: CTP thành công trên cừu - Warwick và Berry 1951: Bê đầu tiên trên thế giới ra đời bằng CTP-Willet và cs 1970: Thành công trong việc bảo quản phôi đông lạnh 1972: CTP phôi đông lạnh thành công trên bò-Bilton và More; Wilmut và Rowson 1978: Em bé đầu tiên ra đời từ TTON và CTP-Steptoe và Edward 6 1982: Vi phẫu thuật phôi bò đã thành công trong phòng thí nghiệm (theo Vlahov, 1987) 1984: Cấy phôi sau khi chia 2 thành công trên bò-William và cs 1987: Có bê sinh ra do cấy ghép gene tăng trởng nhanh (theo Vlahov, 1987) 1992: Bằng kỹ thuật Cloning từ một phôi bò đã cho ra 5 phôi (Viện INRA Pháp, 1992) Một con cừu ra đời và trởng thành từ nhân tế bào tuyến vú của một cừu cái 6 năm tuổi tại Scotland-Ian Wilmut cà cs 7 Các tổ chức hoạt động về CTP trên thế giới 8 TT Dạng hoạt động Số lợng tổ chức 1 Dội rửa, thu hoạch phôi và cấy phôi ngay ở cơ quan 175 2 Dội rửa thu hoạch phôi ở trại 338 3 Cấy phôi ở các trại 241 4 Cấy phôi theo phơng pháp phẫu thuật 157 5 Cấy phôi theo phơng pháp không phẫu thuật 239 6 Đông lạnh phôi 140 7 Xác định giới tính của phôi 11 8 Tổ chức bán trang thiết bị về đông lạnh phôi 94 9 Tổ chức bán hoá chất, hormon dùng gây rụng trứng nhiều, gây động dục đồng pha 4 Số liệu của Hội CTP thế giới 12-1982 - Hội kỹ thuật chăn nuôi Nhật Bản - 1995 3lịch sử CÔNG NGHệ CTP bò ở Việt Nam 9 1978: TT Khoa học tự nhiên và công nghệ quốc gia đã có một bộ phận bắt đầu nghiên cứu CTP thỏ 1980: nghiên cứu CTP bò 1986: con bê đầu tiên ở nớc ta ra đời từ CTP 1989: cấy 50 phôi đông lạnh (giúp đỡ của 2 chuyên gia Cuba) 1994: bò sinh đôi trong đó 1 bê do trứng rụng tự nhiên và 1 bê do CTP 1996,1997: 150 phôi đông lạnh cấy trên bò miền Nam và Hà Nội: những bê sinh ra sinh trởng, phát triển, sinh sản bình thờng, cho sữa vượt toàn đàn 20-30% Bê sinh ra từ công nghệ cấy truyền phôi 10 Bê sinh đôi ra từ một phôi cắt đôi 11 Bê sinh ra từ thụ tinh trong ống nghiệm (IVF) 12 4III. Nguyên tắc của công nghệ CTP 13 14 Thể vàng hoạt động 10-12 ngày) Động đực (1 ngày) Thể vàng phát triển (4-5 ngày) Thể vàng thoái hoá (4-5 ngày) Chu kỳ động dục bình thường của bò cái IV. cơ sở của công nghệ CTP 4.1 Chu kỳ động dục 15 CL Progesterone Estrus Estrus5 10 15 N ồ n g đ ộ H o rm o n e Rụng trứng Rụng trứng Endometrium PGF2a Deviation Dominance Atresia Recruitment PGF2a FSH E2 LH 4.2 Chu kỳ động dục - sểng nang 16 4.3 Súng nang và tớnh trội của nang: Trứng rụng từ chu kỳ trước Súng nang 1 Súng nang 2 Rụng trứng Động dụcĐộng dục Ngày của chu kỳ Đ ư ờ n g k ớn h c ủ a n a n g ( m m ) 517 v. quy trình cấy truyền phôi 18 1. Chọn bò cho phôi 2. Chọn bò nhận phôi 3. Gây động dục hàng loạt 4. Gây rụng trứng nhiều ở bò cho phôi 7. Thu hoạch phôi 9. Bò cho phôi trở lại bình thường chờ chu kỳ sinh sản tiếp theo 5. Bò nhận phôi động dục 8. Cấy phôi cho bò nhận 10. Bò nhận phôi có chửa 11. Đàn con mang tiềm năng di truyền tốt của bò cho phôi 6. Phối giống với đực giống tốt 5.1 chọn bò cho phôi 19 - Bò cái năng suất cao về một hoặc vài tính trạng mong muốn và các tính trạng đó phải đợc di truyền cho thế hệ sau 5.1 chọn bò cho phôi 20 Yêu cầu của bò cho phôi: + Năng suất về tính trạng mong muốn đặc biệt cao, di truyền cho thế hệ sau. u tiên những tính trạng có hệ số di truyền cao và giá trị thương phẩm lớn. + Không mắc bất cứ một khuyết tật hoặc bệnh di truyền nào. + Khả năng sinh sản tốt, quá trình sinh sản bình thường. Cổ tử cung dễ dàng khi đa dẫn tinh quản, súng cấy phôi và đặc biệt là dụng cụ gội rửa phôi 65.1 chọn bò cho phôi 21 + Thể trạng, sức khoẻ tốt, vật nhanh nhẹ, không hung dữ và đợc tiêm phòng tất cả các bệnh + Không quá già (không nên quá 10 tuổi) + Chu kỳ động dục bình thờng, biểu biện chu kỳ rõ ràng. + Buồng trứng hoạt động tốt. 5.2 chọn bò nhận phôi 22 - Bò cái nhận phôi không đóng góp về kiểu di truyền của con nhưng có tác động đến kiểu hình của con non trong thời gian mang thai và nuôi con 5.2 chọn bò nhận phôi 23 Yêu cầu của bò nhận phôi: + Sinh trưởng và phát triển bình thường, không khuyết tật, thể trạng tốt, không quá gầy và không quá béo + Không mắc bệnh di truyền và bệnh truyền nhiễm (Brucellois, Trichomoniasis..., phải được tiêm chủng định kỳ các bệnh đầy đủ + Trạng thái sinh lý sinh sản bình thường 5.2 chọn bò nhận phôi 24 Yêu cầu về chăm sóc, nuôi dỡng bò nhận phôi + Chăm sóc, nuôi dưỡng tốt. + Chủ động theo dõi quá trình mang thai, can thiệp nếu có sự cố xảy ra nh sảy thai, đẻ non, đẻ khó... + Chọn bò tơ hoặc bò sinh sản không quá già và hung dữ + Số lượng bò nhận phôi gấp đôi số phôi cần cấy(10 phôi cần 20 bò nhận phôi) Khi tiêm PGF2 (Prostaglandin F2), tỉ lệ động dục 80%, tỉ lệ động dục có rụng trứng 90%, tỉ lệ động dục đồng pha (1ngày) 70% Số bò có khả năng cấy: 20 x 0,8 x 0,9 x 0,7 = 10.08 (bò) 75.3 Gây động dục đồng pha 25  Gây động dục đồng pha là quá trình kích thích cho cái nhận phôi động dục đúng vào thời điểm động dục của cái cho phôi  Đồng pha giữa cái nhận phôi và cái cho phôi còn có nghĩa trạng thái sinh lý sinh dục của cái nhận phôi phù hợp với tuổi phôi  Mục đích của gây động dục đồng pha là tạo được nhiều bò nhận có thời gian động dục đồng thời với bò cho phôi hoặc phù hợp với tuổi phôi GÂY SIấU BÀI NOÃN 26 Gây siêu bài noãn là quá trình tác động để một lần động dục, buồng trứng bò có nhiều trứng phát triển, chín và rụng đồng thời. Mục đích: thu được nhiều phôi phôi chất lượng cao Hormone: PMSG (Pregnant Mare’s Serum Gonadotropin) FSH (Follicle Stimulating Hormone) HMG (Human Menopausal Gonadotropin) 5.6 Phối giống cho bò cho phôi 27 Thời gian phối giống: Sau khi tiêm PGF2 42-48h (th- ờng phối 2 lần vào chiều ngày thứ 5 và sáng ngày thứ 6 của chu kỳ) Giống đực được phối phải có nhiều đặc điểm tốt, đặc trng cho giống 5.7 giội rửa thu hoạch phôi bò 28 Thu hoạch phôi sau khi phối giống 6-9 ngày, tốt nhất vào ngày thứ 7-8. 8dụng cụ lấy phôi (giội rửa phôi) 29  Dụng cụ lấy phôi 2; 3 đờng.  Lõi thép cho vào catherter  Dung dịch PBS  Thuốc gây tê  Các loại hormone  ......... Phơng pháp giội rửa phôi 30 1. Phẫu thuật 2. Không phẫu thuật Phơng pháp giội rửa phôi 31 1. Phẫu thuật 2. Không phẫu thuật soi tìm phôi 32  Thanh lọc liên tục  Phương pháp lắng đọng  Soi tìm phôi 933 Các giai đoạn phát triển của phôi bò 34 Cấu taọ phôi 35 Các giai đoạn phát triển của phôi bò 36 Các giai đoạn phát triển của phôi bò 10 37 Phôi dâu - Phôi nang 38 Phôi dâu [5-6ngày] 39 Phôi nang thoát màng 40 5.8 cấy truyền phôi cho bò nhận 11 41 bảo quản phôi - kỹ thuật đông lạnh và giải đông phôi 42 CÂU HỎI ễN TẬP Vẽ sơ đồ và trỡnh bày túm tắt cụng nghệ cấy truyền phụi ở bũ? 43