Đồ thị biểu diễn A = f( λ ) (hoặc ε =f( λ ) hoặc lg ε
= f( λ )) gọi là phổ hấp thụ ánh sáng của dung
dịch.
• Phổ hấp thụ thường được biểu diễn dưới dạng
một đường cong cho thấy sự phụ thuộc độ hấp
thụ của một chất bất kì ở trạng thái dung dịch vào
bước sóng của ánh sáng chiếu tới.
• Phổ hấp thụ của một chất được đặc trưng bởi
bước sóng λmax mà tại đó sự hấp thụ là lớn nhất
29 trang |
Chia sẻ: lylyngoc | Lượt xem: 20546 | Lượt tải: 2
Bạn đang xem trước 20 trang tài liệu Quang phổ UV-VIS, để xem tài liệu hoàn chỉnh bạn click vào nút DOWNLOAD ở trên
Quang phổ UV-VIS
Sinh viên:
Nội dung
1. Phổ hấp thụ và nguyên lý
2. Các định luật cơ bản
3. Độ chính xác khi đo phổ hấp thụ
4.Sai số phép đo
5. Phương pháp định lượng
6. Hệ đo Phổ UV-VIS
7. Ứng dụng
I.Phổ hấp thụ UV-VIS
1.Đặc điểm
• Đồ thị biểu diễn A = f( λ ) (hoặc ε =f( λ ) hoặc lg ε
= f( λ )) gọi là phổ hấp thụ ánh sáng của dung
dịch.
• Phổ hấp thụ thường được biểu diễn dưới dạng
một đường cong cho thấy sự phụ thuộc độ hấp
thụ của một chất bất kì ở trạng thái dung dịch vào
bước sóng của ánh sáng chiếu tới.
• Phổ hấp thụ của một chất được đặc trưng bởi
bước sóng max mà tại đó sự hấp thụ là lớn nhất
2. Nguyên lý của phổ hấp thụ
• Khi chiếu một chùm bức xạ điện từ tác động
lên khối vật chất thì sự hấp thụ của khối vật
chất đó phụ thuộc vào bản chất của nó, như
vậy đo lượng tia bức xạ bị hấp thụ ta có thể
xác định được tính chất của vật liệu.
• Phổ hấp thụ ứng dụng tốt nhất đối với những
nguyên tử hoặc phân tử nhỏ.
• Khi ánh sáng tương tác
với các phân tử khí xảy
ra 3 quá trình khác
nhau:
- Quá trình hấp thụ
- Quá trình phát xạ tự
phát
- Quá trình phát xạ kích
thích.
Đối với phổ hấp thụ
chúng ta chỉ xét 2 quá
trình: Hấp thụ và phát
xạ tự phát.
II.Các định luật cơ bản
1.Định luật Lambert
Ta có: 𝑑𝑖 = −𝑘. 𝑖. 𝑑𝑥
⇒
𝑑𝑖
𝑖
= 𝑘. 𝑑𝑥
Bỏ qua phần năng lượng tán xạ, phản xạ. Lấy tích phân hai
vế:
𝑑𝑖
𝑖
= −𝑘. 𝑑𝑥
𝑙
0
𝐼
𝐼0
⇔ ln 𝐼 − ln 𝐼0 = −𝑘. 𝑙
Suy ra:
𝐼 = 𝐼0. 𝑒
−𝑘𝑙
Nội dung: Khi độ dày của lớp môi trường tăng theo cấp số
cộng thì cường độ sáng giảm theo cấp số nhân.
2. Định luật Beer
Cak .
Cba
I
I
..log 0
lg3,2ln
HÖ sè hÊp thô %
Nång ®é (g/l)
§é nghiªng =a.b
A=a.b.C
1
2
HÖ sè truyÒn qua (%)
Nång ®é (g/l)
0
20
40
60
80
100
Hệ số hấp thụ và hệ số truyền qua phụ thuộc vào nồng độ
Kortum và Sieler cho thấy định luật Beer chỉ
áp dụng được khi nồng độ thấp.
Hệ số hấp thụ riêng a phụ thuộc vào chiết
suất môi trường và nồng độ.
Tại C=10exp (-3) chiết suất không thay đổi.
Như vây, khi phân tích dung dich ở nồng độ
cao cần có hiệu chỉnh
220 )2(
n
n
aa
III. §é chÝnh x¸c khi ®o phæ hÊp thô
• CÊp chÝnh x¸c cho biÕt kÕt qu¶ ®o gÇn b»ng gi¸ trÞ
chÊp nhËn. Cßn sai sè m« t¶ tÝnh lÆp l¹i cña phÐp ®o.
• CÊp chÝnh x¸c thêng ®îc x¸c ®Þnh b»ng c¸ch so s¸nh
th«ng n¨ng dI qua khÈu ®é g¾n vµo mÉu vµ ®îc ®ãng
më t¹i c¸c ®iÓm kh¸c nhau trong qu¸ tr×nh hiÖu chØnh.
C¸c th«ng sè cña hÖ ®o ¶nh hëng tíi cÊp chÝnh x¸c lµ:
- §é réng khe: nÕu khe réng qu¸, gi¶i th«ng sÏ réng
h¬n gi¸ trÞ thùc. Cßn nÕu qu¸ hÑp sÏ khã ph©n biÖt
tÝn hiÖu víi mÉu.
- Tèc ®é quÐt qu¸ nhanh còng g©y ra lçi, ®Ønh cña
phæ sÏ bÞ dÞch vÒ vïng bíc sãng thÊp.
- CÊp chÝnh x¸c cña bíc sãng, cÇn ph¶i hiÖu chØnh
tríc khi ®o ®Ó ®¹t ®ù¬c bíc sãng tiªu chuÈn.
- Sù lÖch chïm s¸ng lµ nguyªn nh©n chÝnh g©y mÊt
chÝnh x¸c ®Æc biÖt lµ khi chïm s¸ng yÕu. Nguyªn
nh©n lµ do ¸nh s¸ng bÞ t¸n x¹ do bôi hoÆc Èm mèc ë
bÒ mÆt c¸c dông cô quang häc.
HÖ sè h©p thô thùc sù khi kh«ng cã hiÖn tîng
lÖch tia s¸ng ®îc x¸c ®Þnh nh sau:
Is : cêng ®é ¸nh s¸ng bÞ hÊp thô bëi mÉu chuÈn
s
s
apperent
II
II
A
0log
IV. Sai số phép đo
Sai sè cña hÖ sè truyÒn qua : ∆T
Sai sè cña cêng ®é ¸nh s¸ng : ∆I
Sai sè cña nång ®é : ∆C
• C¸c sai sè nµy suÊt hiÖn khi bÞ nhiÔu khi ®o.
• Gi¸ trÞ cña sai sè trong kho¶ng 0,01 ÷ 0,002
trªn toµn bé thang ®o.
I.Cơ sở lý thuyết
Sai sè t¬ng ®èi cña nång ®é:
• Theo ®Þnh luËt Beer :
→
ab
T
I
I
abab
A
lglog
1 0
)(
434,0
I
dI
ab
TabdT
dC 434,0
)(
434,0
I
dI
AC
dC
V.Các phương pháp định lượng
1. Phương pháp so mầu bằng mắt
Có các cách chủ yếu để định lượng theo phương pháp
so mầu bằng mắt đó là: lập dãy mầu chuẩn, chuẩn độ
so sánh mầu và cân bằng mầu. Phương pháp cho kết
quả với độ chính xác không cao, tuy nhiên rất đơn giản
không cần máy đo phổ. Phương pháp thích hợp trong
việc kiểm tra ngưỡng cho phép của chất nào đó trong
một sản phẩm cụ thể xem có đạt hay không.
2. Phương pháp đường chuẩn
Phương trình cơ bản của phép đo định lượng theo phổ UV−Vis là:
• A= ε. l. C (ε. l = const vậy A = f(C) hàm bậc nhất)
Bằng cách chuẩn bị một dãy dung dịch mầu có nồng độ tăng dần và biết chính
xác trước C1, C2, C3,… (thường là 5−7 nồng độ nằm trong vùng tuyến tính của
mối quan hệ A−C) và dung dịch mầu của chất cần xác định nồng độ trong
cùng điều kiện phân tích như dãy dung dịch chuẩn. Nghiên cứu chọn điều kiện
phù hợp nhất đo phổ của các mẫu chuẩn và mẫu phân tích như các thông số về
thời gian, môi trường, loại cuvet… Đo độ hấp thụ quang của các dung dịch
chuẩn, dựng đường chuẩn theo hệ tọa độ A−C sau đó đo độ hấp thụ quang của
dung dịch chất mầu cần xác định nồng độ (giả sử là Ax), rồi áp vào đường
chuẩn ta sẽ có nồng độ Cx tương ứng với nồng độ chất cần xác định.
Đồ thị chuẩn A-C và cách xác định nồng
độ từ Ax đo được
Phương pháp rất tiện lợi để phân tích hàng loạt mẫu của cùng một chất
trong một loại đối tượng nghiên cứu, nhanh chóng, hiệu suất cao.
3. Phương pháp thêm chuẩn
Nguyên tắc :
Lấy cùng 1 lượng dung dịch cần phân tích 𝐶𝑥 vào 2 bình định mức 1 và 2.
Thêm vào bình 2 một lượng dung dịch chuẩn của chất phân tích 𝐶𝑎 .Thực
hiện phản ứng hiện màu ở cả 2 bình trong các điều kiện thí nghiệm thích hợp
hoàn toàn như nhau.Đem đo D của 2 dung dịch ở 𝜆𝑚𝑎𝑥 . Theo định luật
Lambert – Beer với 𝐷𝑎 𝑣à 𝐷𝑥 ta có:
𝐶𝑥 =
𝐶𝑎. 𝐷𝑥
𝐷𝑎 − 𝐷𝑥
Trong đó: 𝐷𝑥 là mật độ quang của dung dich không thêm.
𝐷𝑎 là mật độ quang của dung dich sau khi thêm.
Dùng phương pháp này có thể loại trừ được ảnh hưởng của các chất lạ, đồng
thời có thể kiểm tra được độ chính xác của phép phân tích
VI. Hệ đo Phổ UV-VIS
1.Nguyên lý
Sơ đồ nguyên lý thiết bị đo quang
1. Nguồn sáng: cung cấp bức xạ ánh sáng vùng trông thấy thì dùng đèn
sợi đốt Vonfram; vùng tử ngoại: dùng đèn hydro, deteri, thuỷ ngân…
2. Hệ tán sắc: hệ tán sắc có nhiệm vụ biến chùm tia đa sắc thành chùm tia
đơn sắc (cung cấp bức xạ đơn sắc). Với các máy thế hệ cũ sử dụng từ 10 tới
12 kính lọc ánh sáng cho dải phổ hẹp chứ không cho hệ đơn sắc. Các máy
hiện đại hơn thì sử dụng lăng kính để cho ánh sáng đơn sắc. Các máy UV-Vis
thế hệ mới sử dụng cách tử (1200−1800 vạch/mm có khi tới 2400 vạch/mm)
có độ phân giải cao từ 1 tới 0,2nm.
3. Mẫu phân tích: chất phân tích có thể cho tác dụng với một thuốc thử
trong môi trường thích hợp nhằm tạo phức chất có độ nhạy đảm bảo tính
định lượng của phương pháp. Nếu chất phân tích là chất khí thì phải chứa
mẫu vào cuvet đóng kín. Cuvet dùng cho phổ UV phải là cuvet thạch anh.
Cuvet dùng cho phổ Vis có thể là cuvet nhựa hoặc cuvet thuỷ tinh
4. Detector: trong các máy đơn giản dùng tế bào quang điện để chuyển tín
hiệu quang thành tín hiệu điện rồi cho qua bộ khuếch đại hiển thị kết quả đo.
Trong các máy thế hệ mới có độ nhạy cao thường dùng detector dạng ống
nhân quang hoặc loại chuỗi diot (DAD). Detector chuỗi diot thích hợp cho
việc đo đồng thời nhiều cấu tử với nhiều bước sóng khác nhau, thiết bị khá
bền
2.Nguyên tắc
Phổ hấp thụ UV-VIS là phổ hấp thụ của các chất tan ở trạng thái dung
dịch dồng thể của một dung môi nhất định như : nước, metanol,
benzen, toluen, cloroform …Vì thế, muốn thực hiện phép đo phổ này ta
phải :
Hòa tan chất phân tích trong một dung môi phù hợp
Chiếu vào dung dich mẫu chứa hợp chất cần phân tích 1 chùm bức
xạ đơn sắc có năng lượng phù hợp để cho chất phân tích hay sản
phẩm của nó hấp thụ bức xạ để tạo ra phổ hấp thụ UV-VIS của nó.
đo cường độ của chùm sáng sau khi đã qua dung dịch mẫu nghiên
cứu
Máy đo UV-VIS 3101
3. Dụng cụ đo phổ
Mô hình máy phổ hấp thụ laser diot điều khiển được: Delta F 700 Series.
Máy phổ UV-VIS-NIR Absorption Spectrophotometer (Cary 5000)
VII.Ứng dụng
-Kiểm tra độ tinh khiết
Vết của tạp chất trong chất hữu cơ được phát hiện dễ
dàng khi nó có cường độ hấp thu đủ lớn
-Nhận biết chất và nghiên cứu cấu trúc
Bằng cách so sánh phổ hấp thu của chất so với phổ
hấp thu của chất trong thiên nhiên hoặc với mẫu chuẩn
có thể cho kết luận về một sản phẩm tổng hợp
-phân tích hôn hợp
Các máy quang phổ uv-vis hiện đại có khả năng xác
định các nồng độ riêng rẽ trong hỗn hợp gồm n cấu tử.
máy sẽ dụng tính chất cộng độ hấp thu để giải hệ
phương trình và cho kết quả nồng độ từng cấu tử trong
hỗn hợp phân tích.
-Xác định khối lượng phân tử
-xác định hằng số phân ly acid-bazo
Xác định hằng số phân ly acid-bazo là một trong
những phương pháp quan trọng để nghiên cứu cấu
trúc các hợp chất hữu cơ.Nội dung của phương pháp là
đo phổ hấp thu của các chất hữu cơ chứa các nhóm có
tính chất acid-bazo phụ thuộc vào ph của môi trường
-Xác định thành phần của phức chất
Thành phần của phức chất trong dung dich có thể
được xác định bằng quang phổ hấp thu tử ngoại và khả
biến theo một trong các phương pháp khác nhau
phương pháp biến số liên tục,phương pháp tỉ lệ mol
Xin chân thành cảm ơn