Phương pháp chuyển gen gián tiếp nhờ agrobacterium

PHƯƠNG PHÁP CHUYỂN GEN GIÁN TIẾP NHỜ AGROBACTERIUM Là vi khuẩn gram (-) Khi ở trong đất sẽ sinh độc tố Gây ung thư ở thực vật mang những plasmid lớn đặc trưng PHƯƠNG PHÁP CHUYỂN GEN GIÁN TIẾP NHỜ AGROBACTERIUM Agrobacterium có khả năng xâm nhiễm vào tế bào thực vật nằng cách chuyển 1 đoạn DNA của nó vào tế bào thực vật Ưu điểm: có hiệu quả Nhược điểm: thực hiện khó trên lớp 1 lá mầm. Chuyển gen nhờ súng DNA “biolistic” Là sử dụng các viên đạn có kích thước hiển vi có tỷ trọng cao để đạt gia tốc cao xuyên qua vỏ và màng tế bào ,đưa lớp DNA bọc ngoài tiếp cận với bộ máy di truyền của tế bào. DNA ngại lai hội nhập với DNA tế bào và biểu hiện, thực hiện quá trình biến nạp gen CÁC LOẠI SÚNG BẮN GEN Súng bắn gen PDS-1000 Súng bắn gen PDS-1000He Súng bắn gen Sauter 1991 CHUYỂN GEN NHỜ VIRUS Virrus dễ dàng bám và lây nhiễm vào tế bào trên những thực vật nguyên vẹn. Một số Virrus lây nhiễm vào thực vật từ vị trí xâm nhiễm và chuyển acid nucleic của nó vào mỗi tế bào sống của ký chủ. Virrus có thể sao chép vài ngàn lần và tồn tại khoảng 103 -105 bản sao trong mỗi tế bào thực vật. Gen của Virrus được đi khắp nơi và vì vậy có biểu hiện mạnh. PHƯƠNG PHÁP VI TIÊM Là phương pháp tiêm các đại phân tử vào trong tế bào thực vật Được theo dõi bằng kính hiển vi và sự thành công được nhận ra bằng một chất phát huỳnh quang được cùng tiêm vào trong tế bào KỸ THUẬT XUNG ĐIỆN Làm rối loạn cấu trúc màng kép phospholipid cho phép các phân tử DNA ngoại lai từ môi trường xâm nhập vào bên trong tế bào Kỹ thuật xung điện (electroporation) là một phương pháp cơ học được sử dụng để đưa các phân tử phân cực vào trong tế bào chủ qua màng tế bào.